NY∕T 3625-2020 稻曲病抗性鉴定技术规程(农业)
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ID： |
E2173F5831B74F1B87C1D9942F36A49E |
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文件大小(MB)： |
0.62 |
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页数： |
12 |
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文件格式： |
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日期： |
2021-12-24 |
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ICS 65.020.01,B 15 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY /T 3625-2020,稻曲病抗性鉴定技术规程,Technical code of practice for identification of rice resistance to,rice false smut [Ustilaginoidea virens(Cooke)Takahashi],2020-07 -27 发布2020-11-01 实施,J九中华人民共和国农业农村部发布,重b,创\,」豆ι 叫，必-,飞1苦h E,、‘二,本标准按照G? T 1. 1-2009 给.I /J的规则起草。/',本标准由农业农村部种指?l~管理司提LU 并归口。rA→ ， ~,本标准起牌位中国水稻研究所、全国农业技术如管局再通l,本标准主要起草人.黄1吨文、王玲、刘连盟、草~荣、仰强朱智伟,NY / T 3625- 2020,I,稻曲病抗性鉴定技术规程,范围,本标稍一规定了水稻品种、材料对稻1111 病抗性的鉴定方法和l评价方法,本标准适用于水稻品种、材料对稻1111 病的抗性鉴定和l抗性评价,2 规范性引用文件,下列文件对于本文,凡是不注:日期的引用文件,3,3. 1,GB 4285,GB 4404. 1,GB/ T 6682,GB/T 8321(,NY / T 496,NY/ T 511,下平l,稻曲病,由在,CNakata) E,危害谷粒。受τ,期2,黄色，后至i翠绿色,硬质的菌核,3. 2,分离物isolate,从发病部位通,3.3,剑叶叶枕~ê: f1ag leaf pulvinus,~ ~,NY /T 3625-2020,日期的版本适用于本文钊,VlrellS,'主要,. 发病初,现淡黄色、,产生黑色、扁平、,粒,水稻剑11"1 从倒二11-/-的叶I[!j!j 中书11 :r \ 后，剑III 叶枕与倒二11.1- 11.1-枕之间的距离。:&1J 11.1- 11-/-枕高于倒二日1- 1I 1- ;fX,时， 为正11-/-枕YE;ft~I I-/- 1叶枕低于倒二11.1- 11.1-枕时， 为负叫一枕距.,3. 4,花粉内容充实期pollen filling stage,花粉母封UJ血减数分裂完成后，四分体分散并随HII变成小球形的花粉粒，花布}外壳逐渐形成，体积继续,增大，出现花粉发芽孔，花粉内容逐渐充实， 直到内容物充满之前，为花粉内容充实剔。此时内外秤纵向1'~,l主接近停止， 被向则迅速增大。剧l E志和I ~t草草迅速增长，位头上依次出现羽状突起， 而颖片退化,4 试剂与材料,本标准所用试~J在未加说明时均采用分析纯试开IJ . 实验室用水应符合GB/T 6682 中规定的三级水,NY/T 3625-2020,要求,4. 1 PSA 培养基,称驭200 g 马铃薯，洗净去皮切碎，力u人1 000 mL 水，煮沸20 m蝞 ，纱布过滤，补水至1000 mL. 再加l,入煎粉20 g 和琼IJI:í 20 g. 搅抖均匀，向压灭ir 021'C . 20 min) ,4. 2 PSB 培养基,称取2 00 g 马铃薯，洗J辛苦去皮切碎，力u人1 000 mL 水，煮沸20 min ， 纱布过滤，补水至1000 mL. IJfI入,股糖20 g. 搅拌均匀，高压灭菌021'C .20 m in ) ,4.3 WA 培养基,琼脂20 g. fFl水定容至1 000 m L. 高压灭菌(l 2 1 'C.20 min).,5 仪器设备,5. 1 恒温培养箱,温度范闹。0'C-50'C. 温度波动， 士1'C ,5.2 光学显微镜,H 镜。1O X ; 物锐， 1 0 X 、40 X ,5. 3 超净工作台,洁净等级，1 00 级@二，，0 . 5 μm. 平均风速， 0 . 25 m/s-O. 6 m/s.,5. 4 高压灭菌锅,温度范军1 ， 0'C- 1 35'C. 灭菌时间范围， 4 min- 120 min. 最高工作压力O . 22 MPa-O. 25 MPa ,5. 5 振荡摇床,温度范围， 0'C-50'C . I!It度波动士1'C. 振动频率， 0 r/ min- 300 r/ min. 振动幅度， 2 0 mm.,5. 6 电子天平.感盘0 . 0 1 g.,5. 7 组织捣li丰机.最高转数20 000 r/ min .,5. 8 医用注射都1 0 mL.,6 接种体制备,6. 1 病原菌分商、纯化与保存,6. 1. 1 病原菌分离,以常规织织分离法从稻111 1球上获得分t~~物。在超净工作台上切徐稻1111 球外层组织，将最内层的I~ 包,部分切成约O . 2 cm X o. 3 cm 的病组织块，先用75% 乙醉浴液消毒1 5 s. 再用灭菌的三级水冲洗3 次，元,菌IJg纸吸干后A凶于PS八平板上.恒1m，培养箱中2S'C 培养.,6. 1. 2 病原菌纯化,分离物培养7 d 以后，从生伏的向色菌落边缘挑取少量菌丝转入新的PSB 培养基上。在2 S'C 下. 1 50,r/ min ，振荡培养5 d-7 d 后，用灭~i水配成每毫于 含1 X 10' 个分生于包子的悬浮液。l吸取100μL 悬浮液,均匀涂布于WA 培养基上，在超净工作俞中I次干。28'C 条件下培养至分~I'. 抱子萌发，在光学显微镜下锐,检，挑~萌发的单个分生袍子置于新的PSA 培养基上， 28 'C 恒1日培养，并保存备用,6. 1. 3 病原菌保存,将待保存的菌株接利'在PSA 培……
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